Estudios de laboratorio
Hubo cinco artículos que informaron los resultados de los estudios de laboratorio, y estos se resumen cronológicamente; todos los resultados se resumen en el archivo Adicional en línea 1: Tabla S1.
En 1972, Sinha y Paul fueron los primeros en informar sobre la supervivencia y multiplicación de ácaros en alimentos secos para perros . Dermatophagoides farinae HDM y Glycyphagus domesticus SM se inocularon en cuatro alimentos comerciales secos para perros y otros sustratos; los autores observaron el crecimiento de estos ácaros durante un poco más de 2 meses. Si bien el Dermatophagoides HDM floreció y se multiplicó en los cuatro alimentos para perros, estos no apoyaron la multiplicación del Glycyphagus SM.
Casi 40 años después, Canfield y Wren probaron la capacidad del SM Tyrophagus putrescentiae para sobrevivir y crecer en tres alimentos comerciales secos para perros . Las croquetas se inocularon con diez ácaros hembra y se observaron durante 5 semanas con mohos que se dejaron crecer en la mitad de las muestras. Tyrophagus ácaros creció en los tres alimentos de perro, con el mayor número de ácaros encontrados cuando los moldes se le había permitido crecer en las croquetas.
En 2015, Hubert y sus colegas evaluaron la capacidad de Tyrophagus putrescentiae para infestar y proliferar en muestras de alimentos para perros almacenados en nueve bolsas de plástico selladas diferentes y una taza con tapa . Los ácaros se colocaron cerca de los paquetes de alimentos cerrados durante 3 meses. Después de ese tiempo, Tyrophagus SM se descubrió en 5/9 bolsas (55%), con los ácaros más a menudo descubiertos en bolsas hechas de monocapas de película de polipropileno o polietileno; los ácaros no habían hecho agujeros en el embalaje en sí, sino que habían entrado en las bolsas a través de sellos defectuosos. Los vasos con tapa no estaban contaminados.
El mismo año, investigadores del mismo laboratorio en la República Checa evaluaron si Tyrophagus putrescentiae SM prefería crecer con dietas ricas en proteínas, grasas o carbohidratos . Los ácaros se adaptaron primero a un alimento comercial para perros rico en proteínas y grasas o a una harina integral de espelta baja en proteínas, baja en grasas pero rica en carbohidratos (ver material suplementario 1 para detalles de la dieta). Después de 6 meses, las dietas se cambiaron dos veces, con 4 semanas de diferencia. Los ácaros de almacenamiento de tirofagos adaptados durante 6 meses en cualquiera de las dietas crecieron mejor en el alimento para perros más rico en proteínas y grasa que en la harina más rica en carbohidratos.
Finalmente, en 2016, los mismos investigadores probaron el crecimiento de Tyrophagus putrescentiae durante 4 semanas en muestras de un solo alimento comercial para perros en diferentes condiciones . En el primer experimento, se encontró que los ácaros crecían mejor en las croquetas verdes y marrones que en las blancas y rojas, pero no se especificó si estas croquetas de diferentes colores tenían la misma composición de nutrientes. En el segundo estudio, la tasa de crecimiento de los ácaros era mayor si las croquetas se aplastaban en lugar de intactas, y cuando la densidad de población inicial de ácaros era más alta (100 ácaros). En el tercero, cuatro cepas diferentes de ácaros tirofágicos crecieron mejor en la comida triturada para perros en comparación con una dieta de cría de HDM. El experimento final confirmó que, cualquiera que sea la cepa de Tirofago, cuanto mayor sea el inóculo inicial de ácaros (es decir, 100), mayor será el recuento final de ácaros.
Estudios de campo
Se encontraron cinco artículos que reportaron los resultados de estudios de campo que investigaron si la HDM o la SM estaban presentes o no en alimentos comerciales para perros: dos estudios fueron puramente descriptivos, mientras que los otros tres investigaron la presencia de ácaros en diferentes condiciones experimentales . Una vez más, describiremos los resultados del estudio en orden cronológico.
En el primer estudio, DeBoer y Schreiner probaron si los alimentos para perros contaminados HDM Dermatophagoides farinae comprados en la región del medio oeste de los Estados Unidos estaban contaminados o no . El material de prueba consistió en 30 muestras de comida seca comercial para perros compradas y 50 obtenidas por el dueño de la mascota. La contaminación por HDM se determinó mediante ELISA para los alérgenos Dermatophagoides del grupo II y no se detectó ninguno.
De manera similar a los resultados anteriores, Henneveld et al. se probaron 23 bolsas diferentes de alimentos secos comerciales para perros en busca de contaminación por ácaros durante un período consecutivo de 6 semanas en Alemania . A pesar de que las bolsas estaban abiertas dos veces al día (y cerradas posteriormente) para alimentar a los perros, no se descubrió SM, mediante el examen microscópico de muestras de flotación , en ninguna de las muestras examinadas.
En 2008, Brazis y sus colegas fueron los primeros en informar sobre la influencia de diferentes condiciones de almacenamiento en la contaminación de alimentos secos para perros con SM en España . Diez alimentos secos comerciales para perros se dejaron abiertos y tres de ellos también se sellaron; bolsas duplicadas se guardaron en un laboratorio o se almacenaron en un garaje ventilado con acceso al aire libre durante 6 semanas. Al comienzo del estudio, los investigadores encontraron un bajo número de ácaros (un fragmento de ácaro y dos Ácaros siro) en 2/10 bolsas de alimentos para perros (20%). En condiciones de almacenamiento en laboratorio a una temperatura media baja (16 °C) y humedad (68%), los ácaros no fueron detectables hasta 6 semanas utilizando dos métodos diferentes. Por el contrario, cuando las bolsas se almacenaron en un garaje con altas temperaturas (promedio: 23 °C) y humedad (promedio: 71%) durante 6 semanas, se encontraron ácaros tirofágicos en 8/10 bolsas abiertas (80%) y en 2/3 (67%) de las réplicas selladas mediante la técnica de flotación, el método de detección más sensible.
En 2011, Gill y otros almacenaron bolsas idénticas de un solo alimento seco comercial para perros en diez hogares diferentes en Escocia . Las bolsas se dividieron a partes iguales entre el saco original con su sello reutilizable, una bolsa de papel cuya parte superior estaba enrollada para el cierre y una caja de plástico con una tapa sellada. Estas réplicas se almacenaban una al lado de la otra, y los alimentos se muestreaban cada mes para la detección de SM. Después de 3 meses, el número de ácaros fue significativamente mayor en las muestras de alimentos almacenadas en bolsas de papel en comparación con el valor basal: 6/10 bolsas de papel tenían ácaros detectables, Dermatofagoides o Tirofagos; se encontraron cuatro y un ácaro en tres bolsas de plástico sellables (30%) y una de diez cajas de plástico (10%), respectivamente. No hubo asociación significativa entre la temperatura o la humedad relativa y el número de ácaros.
En el último estudio de campo, los dueños de perros en el este de Australia proporcionaron 20 muestras de alimentos comerciales secos para perros almacenados en bolsas abiertas o cajas de almacenamiento en entornos domésticos . Las muestras de alimentos se examinaron para detectar la presencia de SM, y una pequeña porción se mantuvo durante dos meses adicionales antes de su incubación en condiciones de humedad y temperatura más altas. Finalmente, se compraron y probaron nueve bolsas nuevas de alimentos comerciales para perros, como las muestras de campo de arriba. En conjunto, los ácaros eran indetectables en cualquier muestra después de cualquiera de los tiempos de incubación. Del mismo modo, no se observó SM al abrir bolsas recién compradas y después de almacenar los alimentos durante 6 semanas a temperatura ambiente. En contraste, al incubar muestras de estos alimentos a alta temperatura (26 °C) y niveles de humedad (80%), el SM estaba presente en 2/9 muestras (22%) tan pronto como 3 semanas después de comenzar el experimento; después de 6 semanas de incubación, 7/9 alimentos (78%) tenían ácaros detectables identificados como Tyrophagus putrescentiae.