Introduction of Potato Dextrose Agar (PDA)
Potato Dextrose Agar ( PDA) is a fungal medium and its ingredients are clear from its name which contains potato ( vegetable), dextrose ( sugar), and agar ( solidifying agent). A PDA a gombák (élesztők és penészgombák) vízből, tejtermékekből, egyéb élelmiszertermékekből, sőt klinikai mintákból ( bőrhulladékokból) történő izolálására és számbavételére ajánlott. A tápanyagban gazdag bázis, a burgonya infúzió ösztönzi a penész sporulációját és a pigmenttermelést egyes dermatofitákban (pl. Trichophyton rubrum).
a Burgonyadextróz-Agar (PDA) elve
a Burgonyadextróz-agar (PDA) dehidratált Burgonyainfúziót és dextrózt tartalmaz. A burgonya infúzió tápanyag-alapot biztosít a legtöbb gomba dús növekedéséhez, míg a dextróz növekedésserkentőként szolgál. A közegben lévő Agar szilárdítószerként működik. A PDA tovább módosította az olyan anyagokat, mint a borkősav, a kloramfenikol és a klórtetraciklin. A borkősav (TA) beépítése a közegbe csökkenti a pH-t 3,5-re, ami gátolja a baktériumok szaporodását. A kloramfenikol szelektív szerként gátolja a Versengő mikroorganizmusok bakteriális túlnövekedését vegyes mintákból, miközben lehetővé teszi a gombák szelektív izolálását. A klórtetraciklin alkalmazása a PDA-ban a kozmetikai termékekből származó élesztő és penész értékelésére szolgál.
összetétele burgonya dextróz Agar (PDA)
burgonya dextróz agar ( PDA) összetevők és mennyiségük a következő-
összetevők Gms / liter
- burgonya, infúzió: 200,0
- dextróz: 20,0
- agar: 15,0
- desztillált víz(nap/nap): 1000 ml
végső pH ( 25 oc-on) 5.6±0.2
burgonya dextróz Agar ( PDA) előállítása)
- szuszpenzió 39,0 gramm burgonya dextróz agar (PDA) 1 liter tisztított/desztillált vagy ionmentesített vízben.
- forrásra melegítjük, hogy a közeg teljesen feloldódjon.
- sterilizáljuk autoklávozással 15 lbs nyomáson (121 db C) 15 percig.
- autoklávozás után hagyjuk lehűlni 45-50 kb C.
- megjegyzés: speciális munkában, ha 3,5 pH szükséges, savanyítsuk meg a közeget steril 10% – os borkősavval. A 100 ml steril, hűtött közeghez szükséges savmennyiség körülbelül 1 ml, és a sav hozzáadása után ne melegítsük újra a közeget.
- adagolás előtt jól keverjük össze.
- öntsön minden tányérba burgonya-dextróz-agart, és hagyja a lemezeket a steril felületen, amíg az agar megszilárdul.
- tárolja a lemezeket hűtőszekrényben, 2-8 C. szám alatt
tárolás és eltarthatóság burgonya dextróz Agar (PDA)
- tárolja 2-8 oc-on, közvetlen fénytől távol.
- a közeget nem szabad használni, ha romlásra (zsugorodásra, repedésre vagy elszíneződésre) vagy szennyeződésre utaló jelek vannak.
- a termék fény-és hőmérséklet-érzékeny; véd a fénytől, a túlzott hőtől, a nedvességtől és a fagyástól.
vizsgálati követelmények
- vizsgálati minták ( minták vagy gombanövekedés)
- Oltóhurok
- Bunsen-égő
- inkubátor
- kontroll törzsek (Candida albicans ATCC ~ 10231 és Trichophyton rubrum
ATCC ® 28188)
vizsgálati eljárás (minta/szervezet beoltása)
- hagyja, hogy a lemezek 37 6c hőmérsékleten vagy szobahőmérsékletre melegedjenek, majd az agar felülete az oltás előtt megszáradjon.
- vegyünk két lemezt egy mintához.
- a mintát a begyűjtést követően a lehető leghamarabb be kell oltani és csíkolni.
- ha a tenyésztendő minta tamponon van, tekerje a tampont az agar felületének egy kis területére.
- csík steril hurokkal történő izoláláshoz.
- inkubáljuk az egyik lemezt aerob módon szobahőmérsékleten ( 20-25 KB), míg egy másik 35-37 Kb legfeljebb 4 hétig ( a feltételezett organizmusok típusától függően)
- vizsgálja meg a kolónia jellemzőit.
PDA eredmények értelmezése
- kontroll törzsek, azaz Candida albicans ATCC 60231 ( gyors termelő) és Trichophyton rubrum (lassú termelő) ATCC 28188): Növekedés jelenléte
- gombák jelenléte a mintában: növekedés jelenléte a PDA-n
a PDA-ban a különböző organizmusok jellemzői
Candida albicans: növekedés; sima fehér kolóniák 24-48 óra elteltével
Trichophyton rubrum: növekedés 7 nap alatt tapasztalható, és 3-4 hétbe telhet, amíg a kolónia hátoldalán a vörös szín látható lesz.
a PDA
- burgonya dextróz Agar módosítása TA-val (borkősavval): élelmiszerek és tejtermékek mikrobiális vizsgálatára használják.
- burgonya dextróz Agar Klórtetraciklinnel: a kozmetikumokból származó élesztő és penész mikrobiális számbavételére szolgál.
- burgonya dextróz Agar kloramfenikollal: vegyes mintákból származó gombák szelektív termesztésére szolgál.
burgonya-dextróz-Agar ( PDA) felhasználása)
- a PDA tejtermékekből, elkészített élelmiszerekből, valamint vízmintákból származó gombák kimutatására szolgál.
- klinikai mintákból származó gombák (élesztők és penészgombák) termesztésére is használják.
- ez a közeg pigment expresszióra is alkalmazható sporuláció.
- a különböző módosított PDA-k és alkalmazásaik a következők: PDA TA-val élelmiszerek és tejtermékek mikrobiális vizsgálatához, míg a klórtetraciklin PDA-k a kozmetikumokból származó élesztő és penész mikrobiális számbavételéhez. A kloramfenikollal ellátott PDA vegyes mintákból származó gombák szelektív termesztésére szolgál.
Keynotes on PDA
- kerülni kell a közeg savasodás utáni melegítését (borkősav beépítése), mivel ez hidrolizálhatja az agart, ami miatt az agar nem tud megszilárdulni.
- 4,0 g burgonyakivonat 200 g burgonyainfúziónak felel meg.
- az eredeti burgonya dextróz agar nemcsak a gombák növekedését támogatja, hanem néhány savas baktériumot is, ezért módosításai előnyösek.
- a klórtetraciklin 40,0 mg, a kloramfenikol 25,0 mg és a borkősav mennyisége 1.4 gm 1000 ml PDA-ban módosított formában is használható.
további olvasmányok a PDA-n
- orvosi mikológia. Szerkesztők: Emmons és Binford, 2. kiadás 1970, kiadó Lea és Febiger, Philadelphia.
- Rippon JW: Orvosi mikrobiológia. A patogén gombák és a patogén aktinomycetes. 3. kiadás 1988 kiadó WB Saunder co, Philadelphia.
- Klinikai Mikrobiológiai eljárás kézikönyve, főszerkesztő H. D. Isenberg, Albert Einstein Orvostudományi Főiskola, New York, kiadó ASM (Amerikai Mikrobiológiai Társaság), Washington DC.
- az orvosi mikológia tankönyve. Szerkesztő: Jagdish Chander. Kiadvány Mehata, India.
- Gyakorlati Laboratóriumi Mikológia. Szerkesztők: Koneman E. W. és G. D. Roberts, 3. kiadás, 1985, Williams and Wilkins kiadó, Baltimore.
- https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/PotatoDextroseAgar.htm
- http://himedialabs.com/TD/M096.pdf
- https://en.wikipedia.org/wiki/Potato_dextrose_agar