Introduction of Potato Dextrose Agar (PDA)
Potato Dextrose Agar ( PDA) is a fungal medium and its ingredients are clear from its name which contains potato ( vegetable), dextrose ( sugar), and agar ( solidifying agent). PDA anbefales for isolering og oppregning av sopp (gjær og mugg) fra vann, meieri, andre matvarer og til og med kliniske prøver (hudskraping). Den næringsrike basen, potetinfusjon oppfordrer mold sporulering og pigmentproduksjon i noen dermatofytter (F.eks.Trichophyton rubrum).
Prinsippet Om Potet Druesukker Agar (PDA)
Potet druesukker agar (PDA) inneholder dehydrert Potet infusjoner Og Druesukker. Potetinfusjon gir en næringsbase for den frodige veksten av de fleste sopp, mens dextrose tjener som vekststimulerende middel. Agar i mediet virker som størkningsmidlet. PDA har videre modifisert inkorporerende midler som vinsyre, kloramfenikol og klortetracyklin. Inkorporering av vinsyre (TA) i mediet senker pH til 3,5 som hemmer bakterievekst. Kloramfenikol virker som et selektivt middel for å hemme bakteriell overvekst av konkurrerende mikroorganismer fra blandede prøver, samtidig som det tillater selektiv isolering av sopp. Anvendelsen av klortetracyklin I PDA er for evaluering av gjær og mugg fra kosmetiske produkter.
Sammensetning Av Potet Druesukker Agar (PDA)
Potet druesukker agar ( PDA) ingredienser og deres mengder er som følger-
Ingredienser Gms / Liter
- Poteter, infusjon fra: 200,0
- Druesukker: 20,0
- agar: 15.0
- destillert vann(d/w): 1000 ml
endelig ph ( ved 25°c) 5.6±0.2
Tilberedning Av Potet Dextrose Agar (PDA)
- Suspend 39.0 gram potet dextrose agar (PDA) i 1 liter renset/destillert eller avionisert vann.
- Varm til koking for å oppløse mediet helt.
- Steriliser ved autoklavering ved 15 lbs trykk (121°C) i 15 minutter.
- etter autoklavering, la det avkjøles til 45-50°C.
- Merk: i spesifikt arbeid, når pH 3,5 er nødvendig, surgjør mediet med steril 10% vinsyre. Mengden syre som kreves for 100 ml sterilt, avkjølt medium er omtrent 1 ml, og oppvarm ikke mediet igjen etter tilsetning av syren.
- Bland godt før dispensering.
- Hell Potet Dextrose Agar i hver plate og la platene stå på den sterile overflaten til agaren har størknet.
- Oppbevar platene i kjøleskap på 2-8°C.
Lagring Og Holdbarhet Av Potet Dextrose Agar (PDA)
- Oppbevares ved 2 – 8º og vekk fra direkte lys.
- Media skal ikke brukes hvis det er tegn på forringelse( krymping, sprekker eller misfarging), forurensning.
- produktet er lett og temperaturfølsomt; beskytter mot lys, sterk varme, fuktighet og frysing.
Testkrav
- Testprøver ( prøver eller soppvekst)
- Inokuleringssløyfe
- Bunsenbrenner
- Inkubator
- kontrollstammer (Candida albicans ATCC ® 10231 og Trichophyton rubrum
atcc® 28188)
Testprosedyre (prøve/organisme inokulering)
- La platene varme ved 37°C Eller til romtemperatur, og agaroverflaten tørke før inokulering.
- Ta to plater for ett eksemplar.
- Inokulere og strikke prøven så snart som mulig etter innsamling.
- hvis prøven som skal dyrkes er på en vattpinne, rull vattpinnen over et lite område av agaroverflaten.
- Strek for isolasjon med en steril sløyfe.
- Inkuber en plate aerobisk ved romtemperatur ( 20-25º), mens en annen 35-37º opptil 4 uker ( avhengig av type organismer som mistenkes)
- Undersøker koloniegenskaper.
Resultat Tolkning AV PDA
- Kontroll stammer dvs. Candida albicans ATCC ® 10231 ( rask dyrker) Og Trichophyton rubrum ( langsom dyrker) Atcc ® 28188): Tilstedeværelse av vekst
- tilstedeværelse av sopp i prøven: Tilstedeværelse av vekst PÅ PDA
Koloniegenskaper av ulike organismer I PDA
Candida albicans: Vekst; glatte hvite kolonier etter 24-48 timer
Trichophyton rubrum: Vekst sett i 7 dager, og det kan ta 3-4 uker for rød farge på baksiden av kolonien å være synlig.
Modifikasjon av PDA
- Potet Dextrose Agar MED TA( Vinsyre): den bruker for mikrobiell undersøkelse av mat og meieriprodukter.
- Potet Dextrose Agar Med Klortetracyklin: den bruker er for mikrobiell oppregning av gjær og mugg fra kosmetikk.
- Potet Dextrose Agar Med Kloramfenikol: den bruker for selektiv dyrking av sopp fra blandede prøver.
Bruk Av Potet Druesukker Agar (PDA)
- PDA bruker for påvisning av sopp fra meieriprodukter, tilberedte matvarer samt vannprøver.
- den bruker også til dyrking av sopp (gjær og mugg) fra kliniske prøver.
- dette mediet er også anvendelig for pigmentuttrykk og sporulering.
- Ulike modifiserte Pdaer og deres applikasjoner er som følger-PDA med TA brukes til mikrobiell undersøkelse av mat og meieriprodukter, MENS PDA med klortetracyklinbruk er for mikrobiell oppregning av gjær og mugg fra kosmetikk. PDA med kloramfenikol bruker for selektiv dyrking av sopp fra blandede prøver.
Keynotes på PDA
- Oppvarming av mediet etter forsuring (inkorporering av vinsyre) bør unngås da det kan hydrolysere agaren som kan gjøre agaren ute av stand til å størkne.
- 4,0 g potetekstrakt tilsvarer 200 g potetinfusjon.
- den opprinnelige potet dextrose agar støtter ikke bare veksten av sopp, men også noen sure bakterier, og dermed er modifikasjonene foretrukket.
- mengden klortetracyklin 40,0 mg, kloramfenikol 25,0 mg og vinsyre 1.4 gm kan brukes i 1000 ml PDA i modifiserte former i tillegg.
Ytterligere Avlesninger på PDA
- Medisinsk Mykologi. Redaktører: Emmons Og Binford, 2. utg 1970, Utgiver Lea Og Febiger, Philadelphia.
- Rippon ‘ S JW: Medisinsk Mikrobiologi. De patogene soppene og De Patogene Actinomycetene. 3. utg 1988 Utgiver WB Saunder co, Philadelphia.
- Håndbok For Klinisk Mikrobiologi, Sjef i redaktør Hd Isenberg, Albert Einstein College Of Medicine, New York, Utgiver ASM (American Society For Microbiology), Washington DC.
- En Tekstbok Av Medisinsk Mykologi. Redaktør: Jagdish Chander. Publikasjon Mehata, India.
- Praktisk Laboratoriemykologi. Redaktører: Koneman E. W. Og G. D. Roberts, 3. utg 1985, Utgiver Williams Og Wilkins, Baltimore.
- https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/PotatoDextroseAgar.htm
- http://himedialabs.com/TD/M096.pdf
- https://en.wikipedia.org/wiki/Potato_dextrose_agar