chromatografia cieczowa (LC) – Wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC), chromatografia jonowa (IC) i chromatografia cieczowa ze spektrometrią mas (LC-MS)
chromatografia cieczowa jest jednym z najpotężniejszych narzędzi w laboratorium analitycznym. Jest bardzo szeroko stosowany do separacji i analizy mieszanin związków wszystkich typów. W połączeniu z czułością i selektywnością spektrometrii masowej jego moc jest znacznie zwiększona.
jak działa Wysokosprawna chromatografia cieczowa, chromatografia jonowa i chromatografia cieczowa ze spektrometrią mas?
w chromatografii ciecz (Faza ruchoma/eluent) pod wysokim ciśnieniem przepływa przez obojętną rurkę (kolumnę) zapakowaną w drobny proszek, który może być pokryty cieczą (Faza stacjonarna). Próbka jest wstrzykiwana do eluentu przed kolumną; gdy porusza się przez kolumnę, czas potrzebny każdemu Związkowi w próbce na dotarcie do końca kolumny jest regulowany przez jego interakcję z eluentem i fazą stacjonarną. Jest to zależne od właściwości związku i może być stosowane do oddzielania mieszanin bardzo podobnych związków. Po oddzieleniu związki mogą być mierzone w miarę ich wyłaniania się z kolumny za pomocą szeregu detektorów, zarówno nieselektywnych, jak i selektywnych, w tym spektrometrów masowych.
Różne materiały opakowaniowe obsługują różne mechanizmy oddzielania –fazę normalną, fazę odwróconą, wykluczenie wielkości, wymianę jonową, powinowactwo, chiralną lub hydrofilową interakcję HPLC. LC w fazie normalnej wykorzystuje polarną fazę stacjonarną i mniej polarny lub niepolarny eluent. W odwrotnej fazie LC polaryzacje te są odwrócone.
jak działa chromatografia jonowa?
chromatografia jonowa (IC) jest wariantem HPLC, w którym stacjonarna interakcja fazowa opiera się na wymianie jonowej. Dlatego stosuje się go do oddzielnych jonów lub naładowanych gatunków. Aniony i kationy są rozdzielone na osobnych kolumnach. W przeciwieństwie do HPLC, gdzie duży nacisk kładzie się na oddzielanie podobnych związków, w IC separacje wydają się być standardowe, a nacisk kładzie się na dokładność i czułość. Ze względu na różne właściwości jonów często stosuje się detektory przewodności; aby poprawić czułość, przewodność tła eluentu jest usuwana przed wykryciem jonów. Aby uzyskać znacznie większą czułość, jony mogą być wstępnie zagęszczone na krótkiej kolumnie wymiany jonowej, a następnie eluowane do strumienia eluentu w celu oddzielenia. Oferuje to bardzo skuteczny sposób oznaczania śladowych poziomów wielu anionów. IC jest często stosowany w celu uzupełnienia oznaczenia ICP-MS metali w próbce.
do czego służy chromatografia cieczowa (LC)?
chromatografia cieczowa obejmuje zdecydowanie najczęstszy zakres technik stosowanych do oznaczania jednego lub wielu składników w mieszaninie. Poprzez odpowiedni dobór fazy eluentnej i stacjonarnej można rozdzielić wszystkie rodzaje związków w roztworze. HPLC służy do wysokociśnieniowego rozdzielania mieszanin związków organicznych. IC umożliwia oznaczanie anionów i kationów oraz innych naładowanych gatunków.. LC-MS ma tę zaletę, że może zapewnić selektywne wykrywanie składników, zmniejszając potrzebę pełnego oddzielenia składników chromatograficznie. Może również dostarczyć dodatkowych informacji o masie strukturalnej i cząsteczkowej, aby pomóc w identyfikacji.
dlaczego używasz chromatografii cieczowej (LC)?
wysokowydajna Chromatorafia cieczowa (HPLC)
HPLC jest techniką z wyboru podczas analizy materiałów pod kątem jak najszerszego zakresu związków organicznych. Lotne związki (VOC i SVOCs) są zwykle najlepiej analizowane przez GC lub GC-MS, ale HPLC ma zastosowanie do znacznie większej różnorodności mieszanin, w tym nielotnych lub termicznie niestabilnych cząsteczek. Jego zalety obejmują wszechstronność, wrażliwość i zastosowanie do bardzo złożonych mieszanek.
chromatografia jonowa (IC)
IC jest wariantem na HPLC, w którym fazą stacjonarną jest żywica jonowymienna. Umożliwia to oddzielenie składników jonowych i naładowanych i jest powszechnie stosowany do oznaczania kationów, a zwłaszcza anionów w próbkach wodnych. Jest łatwy do określenia ilościowego, a dzięki technikom wstępnego zagęszczania może osiągnąć bardzo wysoką czułość.
chromatografia cieczowa ze spektrometrią mas (LC-MS)
LC-MS oferuje wysoką czułość i selektywność. Jest to technika z wyboru do analizy złożonych mieszanin związków, zarówno w celu identyfikacji niewiadomych, jak i uzyskania danych ilościowych na śladowych / drobnych składnikach. Połączenie LC I MS zapewnia wiele informacji, które pomagają w identyfikacji związku.
rodzaje chromatografii cieczowej (LC)
wszechstronność chromatografii cieczowej doprowadziła do szerokiego zakresu oprzyrządowania do różnych zastosowań. Praktycznie wszystkie LC są przeprowadzane pod bardzo wysokim ciśnieniem wymaganym do pompowania fazy ruchomej przez drobne kulki w pakowanym złożu. UHPLC wykorzystuje drobniejsze kulki i działa przy jeszcze wyższych ciśnieniach.
dostępna jest szeroka gama różnych detektorów. MS jest najmocniejszym i najbardziej elastycznym detektorem; wiele detektorów MS to jednostki kwadrupolowe o niskiej rozdzielczości, ale spektrometry mas o wysokiej rozdzielczości oferują możliwość jednoznacznej identyfikacji. Szeroko stosowane detektory obejmują spektrofotometry do większości zastosowań o wysokiej czułości i przewodności elektrycznej dla układów scalonych.
jak uzyskać najdokładniejsze & wiarygodne dane z HPLC przy użyciu ultraczystej wody – Pobierz nasz darmowy podkład już dziś!