Cromatografia Líquida (LC) – Cromatografia Líquida de Alta eficiência (HPLC), Cromatografia de Íons (IC) e a Cromatografia Líquida com Espectrometria de Massa (LC-MS)
cromatografia Líquida é uma das mais poderosas ferramentas na análise laboratorial. É muito utilizado para a separação e análise de misturas de compostos de todos os tipos. Quando combinado com a sensibilidade e seletividade da espectrometria de massa, seu poder é bastante aprimorado.
como funciona a cromatografia líquida de alto desempenho, a cromatografia iônica e a cromatografia líquida com espectrometria de massa?
na cromatografia líquida, um líquido (a fase móvel/eluente) sob alta pressão flui através de um tubo inerte (coluna) embalado com um pó fino que pode ser revestido em um líquido (fase estacionária). Uma amostra é injetada no eluente antes da coluna; à medida que se move através da coluna, o tempo gasto por cada composto na amostra para atingir o final da coluna é governado por sua interação com o eluente e a fase estacionária. Isso depende das propriedades do composto e pode ser usado para separar misturas de compostos muito semelhantes. Uma vez separados, os compostos podem ser medidos à medida que emergem da coluna por uma variedade de detectores, não seletivos e seletivos, incluindo espectrômetros de massa.
diferentes materiais de embalagem suportam diferentes mecanismos de separação –fase normal, fase reversa, exclusão de tamanho, troca iônica, afinidade, quiral ou interação hidrofílica HPLC. A fase normal LC usa uma fase estacionária polar e um eluente menos polar ou não polar. Na fase reversa LC, essas polaridades são invertidas.
como funciona a cromatografia iônica?
a cromatografia iônica (IC) é uma variante na HPLC onde a interação de fase estacionária é baseada na troca iônica. É, portanto, aplicado a íons separados ou espécies carregadas. Ânions e cátions são separados em colunas separadas. Ao contrário da HPLC, onde grande parte do foco está na separação de compostos semelhantes, no IC as separações tendem a ser padrão e a ênfase está na precisão e sensibilidade. Devido às diferentes propriedades dos íons, os detectores de condutividade são freqüentemente usados; para melhorar a sensibilidade, a condutividade de fundo do eluente é removida antes da detecção dos íons. Para alcançar uma sensibilidade muito maior, os íons podem ser pré-centrados em uma coluna de troca iônica curta e, em seguida, eluídos no fluxo eluente para separação. Isso oferece uma maneira muito eficaz de determinar os níveis de rastreamento de muitos Ânions. O IC é frequentemente usado para complementar a determinação do ICP-MS de metais em uma amostra.
para que serve a cromatografia líquida (LC)?A cromatografia líquida inclui de longe a gama mais comum de técnicas usadas para determinar um ou vários componentes em uma mistura. Por escolha adequada de eluente e fase estacionária, todos os tipos de compostos em solução podem ser separados. HPLC é usado para a separação de alta pressão de misturas de compostos orgânicos. O IC permite a determinação de ânions e cátions e outras espécies carregadas.. LC-MS tem a vantagem que pode fornecer a detecção seletiva dos componentes, reduzindo a necessidade de separar inteiramente os componentes cromatograficamente. Pode igualmente fornecer a informação estrutural e molecular extra do peso para ajudar a identificação.
por que você usaria Cromatografia Líquida (LC)?
Cromatoráfia líquida de alto desempenho(HPLC)
HPLC é a técnica de escolha ao analisar materiais para uma gama tão ampla de compostos orgânicos quanto possível. Os compostos voláteis (VOCs e SVOCs) são geralmente melhor analisados por GC ou GC-MS, mas a HPLC é aplicável a uma variedade muito maior de misturas, incluindo moléculas não voláteis ou termicamente instáveis. Suas vantagens incluem versatilidade, sensibilidade e aplicabilidade a misturas muito complexas.
a cromatografia iônica (IC)
IC é uma variante da HPLC na qual a fase estacionária é resina de troca iônica. Isso permite a separação de componentes iônicos e carregados e é comumente usado para determinar cátions e especialmente Ânions em amostras aquosas. É fácil de quantificar e, com técnicas de pré-concentração, pode atingir uma sensibilidade muito alta.
Cromatografia Líquida com Espectrometria de Massa (LC-MS)
LC-MS oferece alta sensibilidade e seletividade. É a técnica de escolha para a análise de misturas complexas de compostos, tanto para a identificação de incógnitas e obter dados quantitativos sobre o rastreamento/menor de componentes. A combinação de LC e MS fornece uma grande quantidade de informações para ajudar a identificação composta.
Tipos de Cromatografia Líquida (LC)
A versatilidade da cromatografia Líquida levou a uma ampla gama de instrumentação para diferentes aplicações. Praticamente todo o LC é realizado sob pressão muito alta necessária para bombear a fase móvel através das contas finas na cama embalada. UHPLC usa grânulos mais finos e opera em pressões ainda mais altas.
há uma vasta gama de detectores diferentes disponíveis. MS é o mais poderoso e flexível; muitos detectores MS são unidades quadrupolais de baixa resolução, mas espectrômetros de massa de alta resolução oferecem o escopo para identificações inequívocas. Os detectores amplamente utilizados incluem espectrofotômetros para a maioria das aplicações de alta sensibilidade e condutividade elétrica para IC.
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