Potato Dextrose Agar (PDA): Introduction, Principle, Composition, Test Procedure, Colony Characteristics and Uses

Introduction of Potato Dextrose Agar (PDA)

Potato Dextrose Agar ( PDA) is a fungal medium and its ingredients are clear from its name which contains potato ( vegetable), dextrose ( sugar), and agar ( solidifying agent). O PDA é recomendado para o isolamento e enumeração de fungos (leveduras e bolores) de água, laticínios, outros produtos alimentícios e até mesmo espécimes clínicos ( restos de pele). A base nutricionalmente rica, a infusão de batata incentiva a esporulação do molde e a produção de pigmentos em alguns dermatófitos (por exemplo, Trichophyton rubrum).

princípio do ágar dextrose de batata (PDA)

o ágar dextrose de batata (PDA) contém infusões de batata desidratadas e Dextrose. A infusão de batata fornece uma base nutritiva para o crescimento luxuriante da maioria dos fungos, enquanto a dextrose serve como estimulante do crescimento. O ágar no meio atua como agente solidificante. O PDA modificou ainda mais os agentes de incorporação como o ácido tartárico, o cloranfenicol e a clortetraciclina. A incorporação de ácido tartárico (TA) no meio reduz o pH para 3,5, O que inibe o crescimento bacteriano. O cloranfenicol atua como um agente seletivo para inibir o crescimento excessivo bacteriano de microrganismos concorrentes de espécimes mistos, permitindo o isolamento seletivo de fungos. A aplicação de chlortetracycline no PDA é para a avaliação do fermento e do molde dos produtos cosméticos.

> Composição da Batata Dextrose Agar (PCA)

Batata dextrose agar ( PCA) ingredientes e suas quantidades são como segue:

Ingredientes Gms / Litro

• Batatas, infusão de: 200.0
• Dextrose: 20.0
• Agar: 15.0
• água Destilada(D/W): 1000 ml
  Final de pH ( 25°C) 5.6±0.2

Preparação da Batata Dextrose Agar ( PCA)

1. Suspender 39.0 gramas de batata dextrose agar ( PCA) em 1 litro purificada/água destilada ou desionizada.
2. aqueça até ferver para dissolver completamente o meio.
3. esterilize por autoclavagem a 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos.
4. após a autoclavagem, deixe para resfriamento a 45-50°C.
5. nota: em trabalhos específicos, quando for necessário pH 3,5, acidifique o meio com ácido tartárico estéril a 10%. A quantidade de ácido necessária para 100 ml de meio estéril e resfriado é de aproximadamente 1 ml e não aqueça o meio novamente após a adição do ácido.
6. misture bem antes de Dispensar.
7. despeje o Ágar Dextrose de batata em cada prato e deixe as placas na superfície estéril até que o ágar solidifique.
8. Guarde as placas no frigorífico a 2-8 ° C.

Armazenamento e prazo de validade do ágar Dextrose de batata (PDA)

• conservar a 2-8ºC e longe da luz directa.
• o meio não deve ser usado se houver sinais de deterioração (encolhimento, rachaduras ou descoloração), contaminação.
• o produto é leve e sensível à temperatura; protege da luz, calor excessivo, umidade e congelamento.

Requisitos de Teste

• amostras de Teste ( amostras ou o crescimento de fungos)
• Inoculando-o loop
• bico de Bunsen
• Incubadora
• Controle de cepas (Candida albicans ATCC ® 10231 e Trichophyton rubrum
  ATCC ® 28188)

procedimento de Teste (amostra/organismo de inoculação)

1. Permite que as placas aquecido a 37°C ou à temperatura ambiente, e a superfície do ágar para secar antes da inoculação.
2. pegue duas placas para um espécime.
3. inocule e raia o espécime o mais rápido possível após a coleta.
4. se a amostra a ser cultivada estiver em um cotonete, role o cotonete sobre uma pequena área da superfície do ágar.
5. Raia para isolamento com laço estéril.
6. incubar uma placa aerobicamente à temperatura ambiente ( 20-25ºC) enquanto outros 35-37ºC até 4 semanas (dependendo do tipo de organismos suspeitos)
7. examinar as características da colônia.

interpretação do resultado de PDA

• cepas de controle, ou seja, Candida albicans ATCC ® 10231 (produtor rápido) e Trichophyton rubrum ( produtor lento) ATCC ® 28188): A presença de crescimento
• a Presença de fungos na amostra: a Presença de crescimento no PDA

Colônia Características de vários organismos no PDA

Candida albicans: Crescimento; branco liso colônias após 24-48 horas

Trichophyton rubrum: Crescimento observado em 7 dias, e pode demorar de 3 a 4 semanas para a cor vermelha no lado inverso da colônia para ser visível.

modificação de PDA

1. ágar dextrose de batata com TA (Ácido Tartárico): utiliza para o exame microbiano de alimentos e laticínios.
2. ágar da dextrose da batata com Chlortetracycline: USA é para a enumeração microbiana do fermento e do molde dos cosméticos.
3. ágar dextrose de batata com cloranfenicol: utiliza para o cultivo seletivo de fungos a partir de amostras mistas.

usos do ágar Dextrose da batata ( PDA)

1. PDA usa para a detecção de fungos de produtos lácteos, alimentos preparados, bem como amostras de água.
2. também utiliza para o cultivo de fungos (leveduras e bolores) a partir de espécimes clínicos.
3. este meio também é aplicável para expressão de pigmento, bem como esporulação.
4. vários PDAs modificados e suas aplicações são as seguintes-PDA com TA usado para o exame microbiano de alimentos e laticínios, enquanto PDA com usos de clortetraciclina são para a enumeração microbiana de levedura e mofo de cosméticos. PDA com cloranfenicol usa para o cultivo seletivo de fungos de amostras mistas.

Keynotes on PDA

1. o aquecimento do meio após a acidificação (incorporação de ácido tartárico) deve ser evitado, pois pode hidrolisar o ágar, o que pode tornar o ágar incapaz de solidificar.
2. 4,0 g de extrato de batata é equivalente a 200 g de infusão de batata.
3. o ágar dextrose de batata original não só suporta o crescimento de fungos, mas também algumas bactérias ácidas e, portanto, suas modificações são preferidas.
4. a quantidade de clortetraciclina 40,0 mg, cloranfenicol 25,0 mg e ácido tartárico 1.4 gm pode usar em 1000 ml de PDA em formas modificadas adicionalmente.

leituras adicionais sobre PDA

1. Micologia médica. Editores: Emmons e Binford, 2ª ed 1970, Editora Lea e Febiger, Filadélfia.
2. Rippon’s JW: Medical Microbiology. Os fungos patogênicos e os actinomicetos patogênicos. 3ª ed 1988 Editora WB Saunder co, Filadélfia.
3. Clinical Microbiology Procedure Handbook, Chief in editor H. D. Isenberg, Albert Einstein College of Medicine, New York, Publisher ASM( American Society for Microbiology), Washington DC.
4. um livro de texto de Micologia médica. Editor: Jagdish Chander. Publicação Mehata, Índia.
5. Micologia Laboratorial Prática. Editores: Koneman E. W. E G. D. Roberts, 3ª ed 1985, Editora Williams e Wilkins, Baltimore.
6. https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/PotatoDextroseAgar.htm
7. http://himedialabs.com/TD/M096.pdf
8. https://en.wikipedia.org/wiki/Potato_dextrose_agar