cromatografie lichidă (LC) – cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC), cromatografie ionică (IC) și cromatografie lichidă cu spectrometrie de masă (LC-MS)
cromatografia lichidă este unul dintre cele mai puternice instrumente din laboratorul analitic. Este foarte utilizat pentru separarea și analiza amestecurilor de compuși de toate tipurile. Atunci când este combinată cu sensibilitatea și selectivitatea spectrometriei de masă, puterea sa este mult îmbunătățită.
cum funcționează cromatografia lichidă de înaltă performanță, cromatografia Ionică și cromatografia lichidă cu spectrometrie de masă?
în cromatografia lichidă, un lichid (faza mobilă/eluentul) sub presiune înaltă curge printr-un tub inert (coloană) ambalat cu o pulbere fină care poate fi acoperită într-un lichid (fază staționară). O probă este injectată în eluent înainte de coloană; pe măsură ce se deplasează prin coloană, timpul necesar fiecărui compus din probă pentru a ajunge la capătul coloanei este guvernat de interacțiunea sa cu eluentul și faza staționară. Aceasta depinde de proprietățile compusului și poate fi utilizată pentru a separa amestecuri de compuși foarte asemănători. Odată separați, compușii pot fi măsurați pe măsură ce ies din coloană printr-o serie de detectoare, atât neselective, cât și selective, inclusiv spectrometre de masă.
diferite materiale de ambalare acceptă diferite mecanisme de separare –fază normală, fază inversă, excludere Dimensiune, schimb de ioni, afinitate, chiral sau interacțiune hidrofilă HPLC. LC în fază normală folosește o fază staționară polară și un eluent mai puțin polar sau nepolar. În faza inversă LC aceste polarități sunt inversate.
cum funcționează cromatografia Ionică?
cromatografia Ionică (IC) este o variantă pe HPLC unde interacțiunea de fază staționară se bazează pe schimbul de ioni. Prin urmare, se aplică ionilor separați sau speciilor încărcate. Anionii și cationii sunt separați pe coloane separate. Spre deosebire de HPLC, unde o mare parte din accentul se pune pe separarea compușilor similari, în IC separările tind să fie standard, iar accentul se pune pe precizie și sensibilitate. Datorită proprietăților diferite ale ionilor, detectoarele de conductivitate sunt adesea folosite; pentru a îmbunătăți sensibilitatea, conductivitatea de fond a eluentului este îndepărtată înainte de detectarea ionilor. Pentru a obține o sensibilitate mult mai mare, ionii pot fi preconcentrați pe o coloană scurtă de schimb de ioni și apoi eluați în fluxul de eluenți pentru separare. Aceasta oferă o modalitate foarte eficientă de a determina nivelurile de urme ale multor anioni. IC este adesea folosit pentru a completa determinarea ICP-MS a metalelor dintr-o probă.
pentru ce este cromatografia lichidă (LC)?
cromatografia lichidă include de departe cea mai comună gamă de tehnici utilizate pentru a determina unul sau mai multe componente dintr-un amestec. Prin alegerea adecvată a fazei eluente și staționare, toate tipurile de compuși în soluție pot fi separate. HPLC este utilizat pentru separarea de înaltă presiune a amestecurilor de compuși organici. IC permite determinarea anionilor și cationilor și a altor specii încărcate.. LC-MS are avantajul că poate asigura detectarea selectivă a componentelor, reducând necesitatea de a separa complet componentele cromatografic. De asemenea, poate oferi informații suplimentare privind greutatea structurală și moleculară pentru a ajuta la identificare.
de ce ați folosi cromatografia lichidă (LC)?
Cromatorafie lichidă de înaltă performanță (HPLC)
HPLC este tehnica de alegere atunci când se analizează materiale pentru o gamă cât mai largă de compuși organici posibil. Compușii volatili (COV și Svoc) sunt de obicei cel mai bine analizați de GC sau GC-MS, dar HPLC este aplicabil unei varietăți mult mai mari de amestecuri, inclusiv molecule nevolatile sau instabile termic. Avantajele sale includ versatilitatea, sensibilitatea și aplicabilitatea la amestecuri foarte complexe.
cromatografie ionică (IC)
IC este o variantă pe HPLC în care faza staționară este rășină schimbătoare de ioni. Acest lucru permite separarea componentelor ionice și încărcate și este utilizat în mod obișnuit pentru a determina cationii și în special anionii în probele apoase. Este ușor de cuantificat și, cu tehnici de pre-concentrare, poate obține o sensibilitate foarte mare.
cromatografia lichidă cu spectrometrie de masă (LC-MS)
LC-MS oferă sensibilitate ridicată și selectivitate. Este tehnica de alegere pentru analiza amestecurilor complexe de compuși atât pentru identificarea necunoscutelor, cât și pentru obținerea datelor cantitative privind urmele/componentele minore. Combinația dintre LC și SM oferă o mulțime de informații pentru a ajuta la identificarea compusului.
tipuri de cromatografie lichidă (LC)
versatilitatea cromatografiei lichide a condus la o gamă largă de instrumente pentru diferite aplicații. Practic, toate LC se realizează sub presiune foarte mare necesară pentru a pompa faza mobilă prin perlele fine din patul ambalat. UHPLC folosește margele mai fine și funcționează la presiuni și mai mari.
există o gamă largă de detectoare diferite disponibile. MS este cel mai puternic și flexibil; multe detectoare MS sunt unități quadrupole cu rezoluție mică, dar spectrometrele de masă de înaltă rezoluție oferă posibilitatea identificării lipsite de ambiguitate. Detectoarele utilizate pe scară largă includ spectrofotometre pentru majoritatea aplicațiilor cu sensibilitate ridicată și conductivitate electrică pentru IC.
cum să obțineți cele mai exacte & date fiabile de la HPLC folosind apă ultrapură – descărcați grundul nostru gratuit astăzi!