Introduction of Potato Dextrose Agar (PDA)
Potato Dextrose Agar ( PDA) is a fungal medium and its ingredients are clear from its name which contains potato ( vegetable), dextrose ( sugar), and agar ( solidifying agent). PDA este recomandat pentru izolarea și enumerarea ciupercilor ( drojdii și mucegaiuri) din apă, lactate, alte produse alimentare și chiar specimene clinice (resturi de piele). Baza bogată din punct de vedere nutrițional, infuzia de cartofi încurajează sporularea mucegaiului și producerea de pigmenți în unele dermatofite (de exemplu Trichophyton rubrum).
principiul agarului de dextroză din cartofi (PDA)
agarul de dextroză din cartofi (PDA) conține infuzii de cartofi deshidratați și dextroză. Infuzia de cartofi oferă o bază nutritivă pentru creșterea luxuriantă a majorității ciupercilor, în timp ce dextroza servește ca stimulent de creștere. Agar în mediu acționează ca agent de solidificare. PDA a modificat în continuare agenți de încorporare precum acidul tartric, cloramfenicolul și clortetraciclina. Încorporarea acidului tartric (TA) în mediu scade pH-ul la 3,5, ceea ce inhibă creșterea bacteriană. Cloramfenicolul acționează ca un agent selectiv pentru a inhiba supraaglomerarea bacteriană a microorganismelor concurente din specimene mixte, permițând în același timp izolarea selectivă a ciupercilor. Aplicarea clortetraciclinei în PDA este pentru evaluarea drojdiei și mucegaiului din produsele cosmetice.
compoziția agarului dextroză de cartof (PDA)
agar dextroză de cartof ( PDA) ingredientele și cantitățile lor sunt următoarele-
ingrediente Gms / litru
- cartofi, infuzie din: 200,0
- dextroză: 20,0
- agar: 15.0
- apă distilată(d/w): 1000 ml
pH final ( la 25 C) 5.6±0.2
prepararea agarului de dextroză din cartofi ( PDA)
- suspendați 39,0 grame agar de dextroză de cartofi (PDA) în 1 litru de apă purificată/distilată sau deionizată.
- se încălzește până la fierbere pentru a dizolva complet mediul.
- sterilizați prin autoclavare la o presiune de 15 lbs (121 CTC) timp de 15 minute.
- după autoclavare, se lasă să se răcească la 45-50 CTC.
- notă: în lucrări specifice, când este necesar pH 3,5, acidificați mediul cu acid tartric steril 10%. Cantitatea de acid necesară pentru 100 ml de mediu steril răcit este de aproximativ 1 ml și nu încălziți din nou mediul după adăugarea acidului.
- se amestecă bine înainte de distribuire.
- se toarnă Agar de dextroză de cartof în fiecare placă și se lasă plăcile pe suprafața sterilă până când agarul s-a solidificat.
- a se păstra farfuriile la frigider la 2-8 cmc.
depozitarea și termenul de valabilitate al agarului dextroză de cartof (PDA)
- a se depozita la 2-8 CENTICC și ferit de lumina directă.
- mediile nu trebuie utilizate dacă există semne de deteriorare (micșorare, fisurare sau decolorare), contaminare.
- produsul este sensibil la lumină și temperatură; protejează de lumină, căldură excesivă, umiditate și îngheț.
cerințe de testare
- eșantioane de testare ( probe sau creștere fungică)
- buclă de inoculare
- arzător Bunsen
- Incubator
- tulpini de Control (Candida albicans atcc 10231 și Trichophyton rubrum
atcc ® 28188)
procedura de testare (inocularea specimenului/organismului)
- se lasă plăcile să se încălzească la 37 C sau la temperatura camerei, iar suprafața agarului să se usuce înainte de inoculare.
- luați două plăci pentru un specimen.
- inoculați și sortați specimenul cât mai curând posibil după colectare.
- dacă specimenul care urmează să fie cultivat se află pe un tampon, rotiți tamponul pe o suprafață mică a suprafeței agarului.
- Streak pentru izolare cu o buclă sterilă.
- se incubează o placă aerob la temperatura camerei ( 20-25 XQC), în timp ce alte 35-37 XQC până la 4 săptămâni ( în funcție de tipul de organisme suspectate)
- examinează caracteristicile coloniei.
interpretarea rezultatelor PDA
- tulpini martor și anume Candida albicans atcc 10231 (cultivator rapid) și Trichophyton rubrum (cultivator lent) atcc 28188): Prezența creșterii
- prezența ciupercilor în specimen: prezența creșterii pe PDA
caracteristicile coloniei diferitelor organisme în PDA
Candida albicans: creștere; colonii albe netede după 24-48 de ore
Trichophyton rubrum: creștere observată în 7 zile și poate dura 3-4 săptămâni pentru ca culoarea roșie pe partea inversă a coloniei să fie vizibilă.
modificarea PDA
- Agar de dextroză de cartofi cu TA (acid tartric): se folosește pentru examinarea microbiană a alimentelor și a produselor lactate.
- Agar de dextroză de cartofi cu clortetraciclină: folosește este pentru enumerarea microbiană a drojdiei și mucegaiului din produse cosmetice.
- Agar de dextroză de cartof cu cloramfenicol: se folosește pentru cultivarea selectivă a ciupercilor din probe mixte.
utilizări ale agarului de dextroză din cartofi ( PDA)
- PDA utilizează pentru detectarea ciupercilor din produse lactate, alimente preparate, precum și probe de apă.
- se folosește și pentru cultivarea ciupercilor (drojdii și mucegaiuri) din specimene clinice.
- acest mediu este aplicabil și pentru expresia pigmentului, precum și pentru sporulare.
- diverse PDA-uri modificate și aplicațiile lor sunt după cum urmează-PDA cu TA utilizat pentru examinarea microbiană a produselor alimentare și lactate, în timp ce PDA cu clortetraciclină utilizări sunt pentru enumerarea microbiană a drojdiei și mucegaiului din produse cosmetice. PDA cu cloramfenicol utilizează pentru cultivarea selectivă a ciupercilor din probe mixte.
Keynotes on PDA
- încălzirea mediului după acidificare (încorporarea acidului tartric) trebuie evitată, deoarece poate hidroliza agarul care poate face ca agarul să nu se poată solidifica.
- 4,0 gm de extract de cartofi este echivalent cu 200 gm de infuzie de cartofi.
- agarul original de dextroză din cartofi nu numai că susține creșterea ciupercilor, ci și unele bacterii acide și, prin urmare, sunt preferate modificările sale.
- cantitatea de clortetraciclină 40,0 mg, cloramfenicol 25,0 mg și acid tartric 1.4 gm poate utiliza în 1000 ml de PDA în forme modificate suplimentar.
citiri suplimentare despre PDA
- Micologie medicală. Editori: Emmons și Binford, ediția a 2-a 1970, Editura Lea și Febiger, Philadelphia.
- Rippon ‘ s JW: Microbiologie medicală. Ciupercile patogene și Actinomicetele patogene. A 3-a ed 1988 Editura WB Saunder co, Philadelphia.
- Manual de proceduri clinice de Microbiologie, șef în redactor H. D. Isenberg, Colegiul de Medicină Albert Einstein, New York, Editor ASM (Societatea Americană pentru Microbiologie), Washington DC.
- o carte de Micologie medicală. Editor: Jagdish Chander. Publicația Mehata, India.
- Micologie Practică De Laborator. Editori: Koneman E. W. și G. D. Roberts, ediția a 3-a 1985, Editor Williams și Wilkins, Baltimore.
- https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/PotatoDextroseAgar.htm
- http://himedialabs.com/TD/M096.pdf
- https://en.wikipedia.org/wiki/Potato_dextrose_agar