kapalinová chromatografie ( LC)-vysoce výkonná kapalinová chromatografie (HPLC), iontová chromatografie (IC) a kapalinová chromatografie s hmotnostní spektrometrií (LC-MS)
kapalinová chromatografie je jedním z nejsilnějších nástrojů v analytické laboratoři. Je velmi široce používán pro separaci a analýzu směsí sloučenin všech typů. V kombinaci s citlivostí a selektivitou hmotnostní spektrometrie je jeho výkon výrazně zvýšen.
jak fungují vysoce výkonná kapalinová chromatografie, iontová chromatografie a kapalinová chromatografie s hmotnostní spektrometrií?
v kapalinové chromatografii proudí kapalina (mobilní fáze/eluent) pod vysokým tlakem inertní trubicí (kolonou) naplněnou jemným práškem, který může být potažen kapalinou (stacionární fází). Vzorek se vstřikuje do eluentu před kolonou; jak se pohybuje kolonou, doba, kterou každá sloučenina ve vzorku trvá, než dosáhne konce kolony, se řídí jeho interakcí s eluentem a stacionární fází. To je závislé na vlastnostech sloučeniny a může být použito k oddělení směsí velmi podobných sloučenin. Po oddělení, sloučeniny mohou být měřeny, jak se vynoří z kolony řadou detektorů, neselektivní i selektivní, včetně hmotnostních spektrometrů.
různé obalové materiály podporují různé separační mechanismy-normální fáze, obrácená fáze, vyloučení velikosti, výměna iontů, afinita, chirální nebo hydrofilní interakce HPLC. LC v normální fázi používá polární stacionární fázi a méně polární nebo nepolární eluent. V reverzní fázi LC jsou tyto polarity obráceny.
jak funguje iontová chromatografie?
iontová chromatografie (IC) je varianta na HPLC, kde stacionární fázová interakce je založena na iontové výměně. Proto se aplikuje na oddělené ionty nebo nabité druhy. Anionty a kationty jsou odděleny na samostatných sloupcích. Na rozdíl od HPLC, kde je velká část zaměření na separaci podobných sloučenin, v IC mají separace tendenci být standardní a důraz je kladen na přesnost a citlivost. Vzhledem k různým vlastnostem iontů se často používají detektory vodivosti; pro zlepšení citlivosti je vodivost pozadí eluentu odstraněna před detekcí iontů. Pro dosažení mnohem vyšší citlivosti mohou být ionty předkoncentrovány na krátké iontoměničové koloně a poté eluovány do eluentního proudu pro separaci. To nabízí velmi účinný způsob stanovení stopových hladin mnoha aniontů. IC se často používá k doplnění ICP-MS stanovení kovů ve vzorku.
k čemu slouží kapalinová chromatografie (LC)?
kapalinová chromatografie zahrnuje zdaleka nejběžnější řadu technik používaných ke stanovení jedné nebo více složek ve směsi. Vhodnou volbou eluentní a stacionární fáze lze oddělit všechny typy sloučenin v roztoku. HPLC se používá pro vysokotlakou separaci směsí organických sloučenin. IC umožňuje stanovení aniontů a kationtů a dalších nabitých druhů.. LC-MS má tu výhodu, že může poskytovat selektivní detekci komponent, což snižuje potřebu chromatografického úplného oddělení komponent. Může také poskytnout další informace o strukturální a molekulové hmotnosti, které napomáhají identifikaci.
proč byste používali kapalinovou chromatografii (LC)?
vysoce výkonná kapalinová chromatografie (HPLC)
HPLC je technika volby při analýze materiálů pro co nejširší škálu organických sloučenin. Těkavé sloučeniny (VOC a svoc) se obvykle nejlépe analyzují pomocí GC nebo GC-MS, ale HPLC je použitelný pro mnohem větší škálu směsí, včetně netěkavých nebo tepelně nestabilních molekul. Mezi jeho výhody patří všestrannost, citlivost a použitelnost na velmi složité směsi.
iontová chromatografie (IC)
IC je varianta na HPLC, ve které je stacionární fází iontoměničová pryskyřice. To umožňuje separaci iontových a nabitých složek a běžně se používá ke stanovení kationtů a zejména aniontů ve vodných vzorcích. Je snadné kvantifikovat a pomocí technik před koncentrací může dosáhnout velmi vysoké citlivosti.
kapalinová chromatografie s hmotnostní spektrometrií (LC-MS)
LC-MS nabízí vysokou citlivost a selektivitu. Je to technika volby pro analýzu komplexních směsí sloučenin jak pro identifikaci neznámých, tak pro získání kvantitativních údajů o stopových / vedlejších složkách. Kombinace LC a MS poskytuje velké množství informací, které pomáhají identifikaci sloučenin.
typy kapalinové chromatografie (LC)
univerzálnost kapalinové chromatografie vedla k široké škále přístrojů pro různé aplikace. Prakticky všechny LC se provádí za velmi vysokého tlaku potřebného k čerpání mobilní fáze přes jemné kuličky v baleném loži. UHPLC používá jemnější kuličky a pracuje při ještě vyšších tlacích.
k dispozici je široká škála různých detektorů. MS je nejvýkonnější a nejflexibilnější; mnoho detektorů MS jsou kvadrupólové jednotky s nízkým rozlišením, ale hmotnostní spektrometry s vysokým rozlišením nabízejí prostor pro jednoznačnou identifikaci. Široce používané detektory zahrnují spektrofotometry pro většinu aplikací s vysokou citlivostí a elektrickou vodivost pro IC.
Jak získat co nejpřesnější & spolehlivá Data z HPLC pomocí ultračisté vody-Stáhněte si náš bezplatný primer ještě dnes!