Potato Dextrose Agar (PDA): Introduction, Principle, Composition, Test Procedure, Colony Characteristics and Uses

Written by on in Articles

Introduction of Potato Dextrose Agar (PDA)

Potato Dextrose Agar ( PDA) is a fungal medium and its ingredients are clear from its name which contains potato ( vegetable), dextrose ( sugar), and agar ( solidifying agent). PDA anbefales til isolering og optælling af svampe (gær og skimmelsvampe) fra vand, mejeriprodukter, andre fødevarer og endda kliniske prøver ( hudafskrabninger). Den ernæringsmæssigt rige base, kartoffelinfusion tilskynder til sporulation af skimmelsvamp og pigmentproduktion i nogle dermatofytter (f.eks.Trichophyton rubrum).

princippet om Kartoffeldestroseagar (PDA)

kartoffeldestroseagar (PDA) indeholder dehydreret kartoffelinfusioner og druesukker. Kartoffelinfusion giver en næringsbase til den frodige vækst af de fleste svampe, mens druesukker fungerer som et vækststimulerende middel. Agar i mediet virker som størkningsmiddel. PDA har yderligere modificeret inkorporering af stoffer som vinsyre, chloramphenicol og chlortetracyclin. Inkorporering af vinsyre (TA) i mediet sænker pH til 3,5, hvilket hæmmer bakterievækst. Chloramphenicol virker som et selektivt middel til at hæmme bakteriel overvækst af konkurrerende mikroorganismer fra blandede prøver, samtidig med at den selektive isolering af svampe tillades. Anvendelsen af chlortetracyclin i PDA er til evaluering af gær og skimmel fra kosmetiske produkter.

sammensætning af Kartoffeldestroseagar (PDA)

kartoffeldestroseagar ( PDA) ingredienser og deres mængder er som følger-

ingredienser Gms / liter

  • kartofler, infusion fra: 200,0
  • druesukker: 20,0
  • agar: 15, 0
  • destilleret vand(d/vægt): 1000 ml
    endelig pH ( ved 25 liter C) 5.6±0.2

tilberedning af Kartoffeldestroseagar (PDA)

  1. hæng 39,0 gram kartoffeldestroseagar ( PDA) i 1 liter renset/destilleret eller deioniseret vand.
  2. varme til kogning for at opløse mediet fuldstændigt.
  3. steriliser ved autoklavering ved 15 lbs tryk (121 liter C) i 15 minutter.
  4. efter autoklavering skal du lade afkøle til 45-50 liter C.
  5. Bemærk: I specifikt arbejde, når pH 3,5 er påkrævet, syrnes mediet med steril 10% vinsyre. Den mængde syre, der kræves til 100 ml sterilt, afkølet medium, er cirka 1 ml, og opvarm ikke mediet igen efter tilsætning af syren.
  6. bland godt inden dispensering.
  7. hæld Kartoffeldestroseagar i hver plade, og lad pladerne stå på den sterile overflade, indtil agaren er størknet.
  8. opbevar pladerne i køleskab ved 2-8 liter C.

opbevaring og holdbarhed af Kartoffeldestroseagar ( PDA)

  • opbevares ved 2-8 liter og væk fra direkte lys.
  • medier bør ikke anvendes, hvis der er tegn på forringelse (krympning, revner eller misfarvning), forurening.
  • produktet er lys-og temperaturfølsomt; beskytter mod lys, overdreven varme, fugt og frysning.

testkrav

  • testprøver ( prøver eller svampevækst)
  • Inokuleringssløjfe
  • bunsenbrænder
  • inkubator
  • Kontrolstammer (Candida albicans ATCC karrus 10231 og Trichophyton rubrum
    ATCC ® 28188)

prøvningsprocedure (podning af prøve / organisme)

  1. lad pladerne varme ved 37 liter C eller til stuetemperatur, og agaroverfladen tørrer inden podning.
  2. tag to plader til en prøve.
  3. inokulere og stribe prøven så hurtigt som muligt efter indsamling.
  4. hvis prøven, der skal dyrkes, er på en vatpind, skal du rulle vatpinden over et lille område af agaroverfladen.
  5. stribe til isolering med en steril sløjfe.
  6. inkuber en plade aerobt ved stuetemperatur ( 20-25 liter), mens en anden 35-37 liter op til 4 uger ( afhængigt af typen af mistænkte organismer)
  7. Undersøg koloniens egenskaber.

Resultatfortolkning af PDA

  • Kontrolstammer, dvs. Candida albicans ATCC-kar 10231 ( hurtigavler) og Trichophyton rubrum ( langsom avler) ATCC-kar 28188): Tilstedeværelse af vækst
  • tilstedeværelse af svampe i prøve: tilstedeværelse af vækst på PDA

Kolonikarakteristika for forskellige organismer i PDA

Candida albicans: vækst; glatte hvide kolonier efter 24-48 timer

Trichophyton rubrum: vækst set på 7 dage, og det kan tage 3-4 uger, før rød farve på bagsiden af kolonien er synlig.

modifikation af PDA

  1. Kartoffeldestroseagar med TA (vinsyre): den bruger til mikrobiel undersøgelse af fødevarer og mejeriprodukter.
  2. Kartoffeldestroseagar med chlortetracyclin: det bruger er til mikrobiel optælling af gær og skimmel fra kosmetik.
  3. Kartoffeldestroseagar med Chloramphenicol: det bruger til selektiv dyrkning af svampe fra blandede prøver.

anvendelse af Kartoffeldestroseagar (PDA)

  1. PDA bruger til påvisning af svampe fra mejeriprodukter, tilberedte fødevarer samt vandprøver.
  2. det bruger også til dyrkning af svampe (gær og forme) fra kliniske prøver.
  3. dette medium er også anvendeligt til pigmentekspression samt sporulation.
  4. forskellige modificerede PDA ‘ er og deres anvendelser er som følger-PDA med TA anvendt til mikrobiel undersøgelse af fødevarer og mejeriprodukter, mens PDA med chlortetracyclin anvendelser er til mikrobiel optælling af gær og skimmel fra kosmetik. PDA med chloramphenicol bruger til selektiv dyrkning af svampe fra blandede prøver.

Keynotes on PDA

  1. opvarmning af mediet efter forsuring (inkorporering af vinsyre) bør undgås, da det kan hydrolysere agaren, hvilket kan gøre agaren ude af stand til at størkne.
  2. 4,0 g kartoffelekstrakt svarer til 200 g kartoffelinfusion.
  3. den originale kartoffeldestroseagar understøtter ikke kun væksten af svampe, men også nogle sure bakterier, og derfor foretrækkes dens ændringer.
  4. mængden af chlortetracyclin 40,0 mg, chloramphenicol 25,0 mg og vinsyre 1.4 gm kan også anvendes i 1000 ml PDA i modificerede former.

yderligere aflæsninger på PDA

  1. medicinsk mykologi. Redaktører: Emmons og Binford, 2. udgave 1970, udgiver Lea og Febiger, Philadelphia.
  2. Rippons JV: Medicinsk Mikrobiologi. De patogene svampe og de patogene Actinomycetes. 3. udgave 1988 udgiver Saunder co, Philadelphia.
  3. Klinisk Mikrobiologi Procedure Håndbog, chef i redaktør H. D. Isenberg, Albert Einstein College of Medicine, Ny York, udgiver ASM (American Society for Microbiology), Amerikansk DC.
  4. en tekstbog om medicinsk mykologi. Redaktør: Jagdish Chander. Offentliggørelse Mehata, Indien.
  5. Praktisk Laboratoriemykologi. Redaktører: Koneman E. V. og G. D. Roberts, 3. udgave 1985, udgiver.
  6. https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/PotatoDextroseAgar.htm
  7. http://himedialabs.com/TD/M096.pdf
  8. https://en.wikipedia.org/wiki/Potato_dextrose_agar

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.