væskekromatografi (LC) – højtydende væskekromatografi (HPLC), Ionkromatografi (IC) og væskekromatografi med massespektrometri (LC-MS)
væskekromatografi er et af de mest kraftfulde værktøjer i det analytiske laboratorium. Det er meget udbredt til adskillelse og analyse af blandinger af forbindelser af alle typer. Når det kombineres med følsomheden og selektiviteten af massespektrometri, forbedres dens styrke kraftigt.
hvordan fungerer højtydende væskekromatografi, Ionkromatografi og væskekromatografi med massespektrometri?
ved væskekromatografi strømmer en væske (den mobile fase/eluent) under højt tryk gennem et inert rør (søjle) pakket med et fint pulver, der kan overtrækkes i en væske (stationær fase). En prøve injiceres i eluenten før søjlen; når den bevæger sig gennem søjlen, styres den tid, som hver forbindelse i prøven tager for at nå slutningen af søjlen, af dens interaktion med eluenten og den stationære fase. Dette afhænger af forbindelsens egenskaber og kan bruges til at adskille blandinger af meget lignende forbindelser. Når de er adskilt, kan forbindelserne måles, når de kommer ud af søjlen af en række detektorer, både ikke-selektive og selektive, inklusive massespektrometre.
forskellige emballagematerialer understøtter forskellige separationsmekanismer –normal fase, omvendt fase, størrelseseksklusion, ionbytning, affinitet, chiral eller hydrofil interaktion HPLC. Normal fase LC bruger en polær stationær fase og en mindre polær eller ikke-polær eluent. I omvendt fase LC vendes disse polariteter.
hvordan virker Ionkromatografi?
Ionkromatografi (IC) er en variant på HPLC, hvor den stationære faseinteraktion er baseret på ionbytning. Det anvendes derfor på separate ioner eller ladede arter. Anioner og kationer er adskilt på separate kolonner. I modsætning til HPLC, hvor meget af fokus er på at adskille lignende forbindelser, har separationerne i IC tendens til at være standard, og der lægges vægt på nøjagtighed og følsomhed. På grund af ionernes forskellige egenskaber anvendes konduktivitetsdetektorer ofte; for at forbedre følsomheden baggrund ledningsevne af eluenten fjernes før påvisning af ionerne. For at opnå meget højere følsomhed kan ionerne forkoncentreres på en kort ionbytningskolonne og derefter elueres i eluentstrømmen til adskillelse. Dette giver en meget effektiv måde at bestemme sporniveauer for mange anioner. IC bruges ofte til at supplere ICP-MS bestemmelse af metaller i en prøve.
hvad er væskekromatografi (LC) til?
væskekromatografi inkluderer langt det mest almindelige udvalg af teknikker, der bruges til at bestemme en eller flere komponenter i en blanding. Ved passende valg af eluent og stationær fase kan alle typer forbindelser i opløsning adskilles. HPLC anvendes til højtryksseparation af blandinger af organiske forbindelser. IC muliggør bestemmelse af anioner og kationer og andre ladede arter.. LC-MS har den fordel, at det kan tilvejebringe selektiv detektion af komponenter, hvilket reducerer behovet for fuldt ud at adskille komponenterne kromatografisk. Det kan også give ekstra strukturel og molekylvægt information til at hjælpe identifikation.
hvorfor ville du bruge væskekromatografi (LC)?
højtydende Væskekromatoraphy (HPLC)
HPLC er den valgte teknik, når man analyserer materialer til en så bred vifte af organiske forbindelser som muligt. Flygtige forbindelser (VOC ‘er og Svoc’ er) analyseres normalt bedst af GC eller GC-MS, men HPLC kan anvendes på en langt større række blandinger, herunder ikke-flygtige eller termisk ustabile molekyler. Dens fordele omfatter alsidighed, følsomhed og anvendelighed til meget komplekse blandinger.
Ionkromatografi (IC)
IC er en variant på HPLC, hvor den stationære fase er ionbytterharpiks. Dette muliggør adskillelse af ioniske og ladede komponenter, og det bruges almindeligvis til at bestemme kationer og især anioner i vandige prøver. Det er let at kvantificere og kan med prækoncentrationsteknikker opnå meget høj følsomhed.
væskekromatografi med massespektrometri (LC-MS)
LC-MS tilbyder høj følsomhed og selektivitet. Det er den valgte teknik til analyse af komplekse blandinger af forbindelser både til identifikation af ukendte og for at opnå kvantitative data om spor/mindre komponenter. Kombinationen af LC og MS giver en hel del information til at hjælpe forbindelse identifikation.
typer af væskekromatografi (LC)
alsidigheden af væskekromatografi har ført til en bred vifte af instrumentering til forskellige applikationer. Næsten alle LC udføres under meget højt tryk, der kræves for at pumpe den mobile fase gennem de fine perler i den pakkede seng. UHPLC bruger finere perler og fungerer ved endnu højere tryk.
der er en bred vifte af forskellige detektorer til rådighed. MS er den mest kraftfulde og fleksible; mange MS-detektorer er firpolede enheder med lav opløsning, men massespektrometre med høj opløsning giver mulighed for entydige identifikationer. Udbredte detektorer inkluderer spektrofotometre til de fleste applikationer med høj følsomhed og elektrisk ledningsevne til IC.
Sådan får du den mest nøjagtige & pålidelige Data fra HPLC ved hjælp af Ultrapure vand – Hent vores gratis primer i dag!