Potato Dextrose Agar (PDA): Introduction, Principle, Composition, Test Procedure, Colony Characteristics and Uses

Geschreven door op in Articles

Introduction of Potato Dextrose Agar (PDA)

Potato Dextrose Agar ( PDA) is a fungal medium and its ingredients are clear from its name which contains potato ( vegetable), dextrose ( sugar), and agar ( solidifying agent). PDA wordt aanbevolen voor de isolatie en telling van schimmels (gisten en schimmels) uit water, zuivel, andere voedingsmiddelen, en zelfs klinische specimens ( scrappings van de huid). De voedingsrijke basis, aardappel infusie stimuleert schimmel sporulatie en pigment productie in sommige dermatofyten (bijvoorbeeld Trichophyton rubrum).

principe van Aardappeldextroseagar (PDA)

Aardappeldextroseagar (PDA) bevat gedehydrateerde aardappelinfusies en Dextrose. Aardappelinfusie biedt een voedingsbasis voor de weelderige groei van de meeste schimmels, terwijl dextrose dienst doet als groeistimulans. Agar in het medium fungeert als stollingsmiddel. PDA heeft verder het opnemen van agenten zoals wijnsteenzuur, chlooramfenicol, en chloortetracycline gewijzigd. De opname van wijnsteenzuur (TA) in het medium verlaagt de pH tot 3,5, wat de bacteriegroei remt. Chlooramphenicol doet dienst als selectieve agent om de bacteriële overgroei van concurrerende micro-organismen van gemengde specimens te remmen terwijl het toestaan van de selectieve isolatie van schimmels. De toepassing van chloortetracycline in PDA is voor de evaluatie van gist en schimmel uit cosmetische producten.

Samenstelling van Potato Dextrose Agar (PDA)

Potato dextrose agar ( PDA) ingrediënten en de bedragen zijn als volgt:

Ingrediënten Gms / Liter

  • Aardappelen, infusie van: 200.0
  • Dextrose: 20.0
  • Agar: 15.0
  • Gedestilleerd water(O/W): 1000 ml
    Uiteindelijke pH-waarde ( bij 25°C) 5.6±0.2

Voorbereiding van Potato Dextrose Agar ( PDA)

  1. Schorten 39.0 gram potato dextrose agar ( PDA) in 1 liter gezuiverd of gedistilleerd of gedeïoniseerd water.
  2. verhit tot koken om het medium volledig op te lossen.
  3. steriliseren door gedurende 15 minuten bij 121°C een autoclaaf te gebruiken.
  4. na het autoclaveren laten afkoelen tot 45-50°C.
  5. opmerking: bij specifieke werkzaamheden, wanneer een pH van 3,5 vereist is, het medium aanzuren met steriel 10% wijnsteenzuur. De hoeveelheid zuur die nodig is voor 100 ml steriel, gekoeld medium is ongeveer 1 ml en verhit het medium niet opnieuw na toevoeging van het zuur.
  6. goed mengen voor toediening.
  7. giet Aardappeldextroseagar in elke plaat en laat de platen op het steriele oppervlak liggen totdat de agar is gestold.
  8. bewaar de platen in de koelkast bij 2-8°C.

opslag en houdbaarheid van Dextroseagar ( PDA))

  • Bewaren bij 2-8ºC en uit de buurt van direct licht.
  • Media dienen niet te worden gebruikt als er tekenen zijn van verslechtering (krimpen, barsten of verkleuring), contaminatie.
  • het product is licht en temperatuurgevoelig; beschermt tegen licht, overmatige hitte, vocht en bevriezing.

Test-Eisen

  • monsters ( samples of schimmelgroei)
  • Enten loop
  • Bunsen-brander
  • Incubator

    • Control stammen (Candida albicans ATCC ® 10231 en Trichophyton rubrum
    ATCC ® 28188)

Test procedure (model/organisme inenting)

  1. Laat de platen te warm bij 37°C of op kamertemperatuur, en de agar-agar oppervlak droog is voordat u het enten.
  2. neem twee platen voor één monster.
  3. Ent het monster zo spoedig mogelijk na de verzameling en strek het zo snel mogelijk.
  4. als het te kweken monster op een wattenstaafje ligt, rol het wattenstaafje dan over een klein gedeelte van het agar-oppervlak.
  5. streep voor isolatie met een steriele lus.Incubeer één plaat aeroob bij kamertemperatuur ( 20-25ºC), terwijl een andere 35-37ºC tot 4 weken ( afhankelijk van het type vermoedelijke organismen)
  6. de kenmerken van de kolonie onderzoeken.Interpretatie van PDA
    • Controlestammen i. e. Candida albicans ATCC ® 10231 (snelle kweker) en Trichophyton rubrum (langzame kweker) ATCC ® 28188): Aanwezigheid van groei
    • aanwezigheid van schimmels in specimen: aanwezigheid van groei op PDA

    kolonie kenmerken van verschillende organismen in PDA

    Candida albicans: groei; gladde witte kolonies na 24-48 uur

    Trichophyton rubrum: groei waargenomen na 7 dagen en het kan 3-4 weken duren voordat de rode kleur aan de achterzijde van de kolonie zichtbaar is.

    Modification of PDA

    1. Potato Dextrose Agar with TA (wijnsteenzuur): it uses for the microbial examination of food and dairy products.
    2. Aardappeldextroseagar met Chloortetracycline: wordt gebruikt voor de microbiële telling van gist en schimmels uit cosmetica.
    3. Aardappeldextroseagar met chlooramfenicol: gebruikt voor de selectieve teelt van schimmels uit gemengde monsters.

    gebruik van Dextroseagar ( PDA))

    1. PDA gebruikt voor de detectie van schimmels uit zuivelproducten, bereide voedingsmiddelen en watermonsters.
    2. wordt ook gebruikt voor de teelt van schimmels (gisten en schimmels) van klinische specimens.
    3. dit medium is ook toepasbaar voor pigmentexpressie als putsporulatie.
    4. verschillende gewijzigde PDA ‘ s en hun toepassingen zijn als volgt: PDA met TA gebruikt voor het microbieel onderzoek van levensmiddelen en zuivelproducten, terwijl PDA met chloortetracycline gebruikt wordt voor de microbiële telling van gist en schimmel uit cosmetica. PDA met chlooramfenicol gebruikt voor de selectieve teelt van schimmels uit gemengde monsters.

    Keynotes op PDA

    1. verhitting van het medium na aanzuring (toevoeging van wijnsteenzuur) moeten worden vermeden, omdat het de agar kan hydrolyseren waardoor de agar niet kan stollen.
    2. 4,0 g aardappelextract komt overeen met 200 g aardappelinfusie.
    3. de oorspronkelijke dextrose agar van aardappelen ondersteunt niet alleen de groei van schimmels, maar ook van enkele zure bacteriën, waardoor de voorkeur wordt gegeven aan modificaties.
    4. de hoeveelheid chloortetracycline 40,0 mg, chlooramfenicol 25,0 mg en wijnsteenzuur 1.4 gm kan bovendien in 1000 ml PDA in gewijzigde vormen gebruiken.

    verdere metingen op PDA

    1. medische Mycologie. Editors: Emmons and Binford, 2nd ed 1970, Publisher Lea and Febiger, Philadelphia.
    2. Rippon ‘ s JW: Medical Microbiology. De pathogene schimmels en de pathogene Actinomycetes. 3rd ed 1988 uitgever WB Saunder co, Philadelphia.Klinische microbiologie Procedure Handbook, Chief In editor H. D. Isenberg, Albert Einstein College Of Medicine, New York, Publisher ASM (American Society for Microbiology), Washington DC.
    3. A Text-Book of Medical Mycology. Editor: Jagdish Chander. Publicatie Mehata, India.
    4. Practical Laboratory Mycology. Editors: Koneman E. W. and G. D. Roberts, 3rd ed 1985, Publisher Williams and Wilkins, Baltimore.
    5. https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/PotatoDextroseAgar.htm
    6. http://himedialabs.com/TD/M096.pdf
    7. https://en.wikipedia.org/wiki/Potato_dextrose_agar

Geef een antwoord

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd.