vloeistofchromatografie (LC) – hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC), ionchromatografie (IC) en vloeistofchromatografie met massaspectrometrie (LC-MS)
vloeistofchromatografie is een van de krachtigste instrumenten in het analytische laboratorium. Het wordt zeer veel gebruikt voor de scheiding en analyse van mengsels van verbindingen van alle soorten. Wanneer gecombineerd met de gevoeligheid en selectiviteit van massaspectrometrie wordt zijn macht zeer verbeterd.
Hoe werken hogedrukvloeistofchromatografie, ionchromatografie en vloeistofchromatografie met massaspectrometrie?
in vloeistofchromatografie stroomt een vloeistof (de mobiele fase/eluent) onder hoge druk door een inerte buis (kolom) verpakt met een fijn poeder dat kan worden bekleed in een vloeistof (stationaire fase). Een steekproef wordt ingespoten in het eluent vóór de kolom; aangezien het door de kolom beweegt wordt de tijd door elke samenstelling in de steekproef genomen om het eind van de kolom te bereiken door zijn interactie met het eluent en de stationaire fase geregeerd. Dit is afhankelijk van de eigenschappen van de samenstelling en kan aan afzonderlijke mengsels van zeer gelijkaardige samenstellingen worden gebruikt. Eenmaal gescheiden, kunnen de samenstellingen worden gemeten aangezien zij uit de kolom door een waaier van detectoren, zowel niet-selectieve als selectieve, met inbegrip van massaspectrometers voortkomen.
verschillende verpakkingsmaterialen ondersteunen verschillende scheidingsmechanismen-normale fase, reversed-fase, grootteuitsluiting, ionenuitwisseling, affiniteit, chirale of hydrofiele interactie HPLC. Normaal-fase LC gebruikt een polaire stationaire fase en een minder polaire of apolaire eluent. In omgekeerde fase LC worden deze polariteiten omgekeerd.
Hoe werkt ionchromatografie?
ionchromatografie (IC) is een variant op HPLC waarbij de stationaire fase-interactie gebaseerd is op ionenuitwisseling. Het wordt daarom toegepast op afzonderlijke ionen of geladen soorten. Anionen en kationen zijn gescheiden op afzonderlijke kolommen. In tegenstelling tot HPLC waar veel van de nadruk op het scheiden van gelijkaardige samenstellingen is, neigen de scheidingen in IC om norm te zijn en de nadruk is op nauwkeurigheid en gevoeligheid. Vanwege de verschillende eigenschappen van ionen, worden geleidbaarheidsmeters vaak gebruikt; om de gevoeligheid te verbeteren wordt de achtergrondgeleiding van het eluent verwijderd vóór detectie van de ionen. Om veel hogere gevoeligheid te bereiken kunnen de ionen vooraf worden geconcentreerd op een korte ionenwisselkolom en dan in de eluentstroom voor scheiding worden geëlueerd. Dit biedt een zeer effectieve manier om sporenniveaus van vele anionen te bepalen. IC wordt vaak gebruikt om de ICP-MS-bepaling van metalen in een steekproef aan te vullen.
waarvoor is vloeistofchromatografie (LC)?
vloeistofchromatografie omvat verreweg de meest voorkomende technieken die worden gebruikt om een of meer bestanddelen in een mengsel te bepalen. Door geschikte keuze van eluente en stationaire fase kunnen alle soorten verbindingen in oplossing worden gescheiden. HPLC wordt gebruikt voor de scheiding onder hoge druk van mengsels van organische verbindingen. IC maakt de bepaling van anionen en kationen en andere geladen soorten mogelijk.. LC-lidstaten heeft het voordeel dat het selectieve opsporing van componenten kan verstrekken, die de behoefte verminderen om de componenten chromatografisch volledig te scheiden. Het kan ook extra structurele en moleculaire gewichtsinformatie verstrekken om identificatie bij te staan.
waarom zou u vloeistofchromatografie (LC) gebruiken?
vloeibare Chromatoraphy (HPLC)
HPLC is de techniek bij uitstek voor de analyse van materialen voor een zo groot mogelijk aantal organische verbindingen. Vluchtige verbindingen (Vos en SVOCs) worden meestal het best geanalyseerd door GC of GC-MS, maar HPLC is van toepassing op een veel grotere verscheidenheid van mengsels, met inbegrip van niet-vluchtige of thermisch onstabiele moleculen. De voordelen zijn veelzijdigheid, gevoeligheid en toepasbaarheid op zeer complexe mengsels.
ionchromatografie (IC)
IC is een variant op HPLC waarbij de stationaire fase ionenwisselingshars is. Dit laat de scheiding van ionische en geladen componenten toe en het wordt algemeen gebruikt om kationen en vooral anionen in waterige steekproeven te bepalen. Het is gemakkelijk te kwantificeren en, met pre-concentratietechnieken, kan zeer hoge gevoeligheid bereiken.
vloeistofchromatografie met massaspectrometrie (LC-MS)
LC-MS biedt een hoge gevoeligheid en selectiviteit. Het is de voorkeurstechniek voor de analyse van complexe mengsels van verbindingen, zowel voor de identificatie van onbekenden als voor het verkrijgen van kwantitatieve gegevens over trace/minor componenten. De combinatie van LC en lidstaten verstrekt veel informatie om samenstellingsidentificatie te helpen.
typen vloeistofchromatografie (LC)
de veelzijdigheid van vloeistofchromatografie heeft geleid tot een breed scala aan instrumenten voor verschillende toepassingen. Vrijwel alle LC wordt uitgevoerd onder zeer hoge druk die nodig is om de mobiele fase door de fijne kralen in het verpakte bed te pompen. UHPLC gebruikt fijnere kralen en werkt bij nog hogere drukken.
er is een groot aantal verschillende detectoren beschikbaar. Lidstaten zijn krachtigste en flexibele; vele detectoren van lidstaten zijn eenheden van lage resolutie quadrupole maar de spectrometers van de hoge resolutie bieden het werkingsgebied voor ondubbelzinnige identificaties aan. Veelgebruikte detectoren omvatten spectrofotometers voor de meeste toepassingen met hoge gevoeligheid en elektrische geleidbaarheid voor IC.
Hoe krijg ik de meest nauwkeurige & betrouwbare gegevens van HPLC met behulp van Ultrapure Water-Download vandaag nog onze gratis primer!