Introduction of Potato Dextrose Agar (PDA)
Potato Dextrose Agar ( PDA) is a fungal medium and its ingredients are clear from its name which contains potato ( vegetable), dextrose ( sugar), and agar ( solidifying agent). PDA rekommenderas för isolering och uppräkning av svampar (jäst och mögel) från vatten, mejeri, andra livsmedelsprodukter och till och med kliniska prover ( hudskrapningar). Den näringsrika basen, potatisinfusion uppmuntrar mögelsporulering och pigmentproduktion i vissa dermatofyter (t.ex.Trichophyton rubrum).
princip för Potato Dextrose Agar (PDA)
Potato dextrose agar (PDA) innehåller dehydratiserade potatisinfusioner och dextros. Potatisinfusion ger en näringsbas för den frodiga tillväxten hos de flesta svampar medan dextros fungerar som ett tillväxtstimulansmedel. Agar i mediet fungerar som stelningsmedlet. PDA har ytterligare modifierat införlivande medel som vinsyra, kloramfenikol och klortetracyklin. Införlivandet av vinsyra (TA) i mediet sänker pH till 3, 5 vilket hämmar bakterietillväxt. Kloramfenikol fungerar som ett selektivt medel för att hämma bakteriell överväxt av konkurrerande mikroorganismer från blandade prover samtidigt som den tillåter selektiv isolering av svampar. Tillämpningen av klortetracyklin i PDA är för utvärdering av jäst och mögel från kosmetiska produkter.
sammansättning av potatis dextros Agar (PDA)
potatis dextros agar ( PDA) ingredienser och deras mängder är följande-
ingredienser Gms / liter
- potatis, infusion från: 200.0
- dextros: 20.0
- agar: 15,0
- destillerat vatten(d/w): 1000 ml
slutligt pH ( vid 25) 5.6±0.2
framställning av potatis dextros Agar ( PDA)
- suspendera 39,0 gram potatis dextros agar (PDA) i 1 liter renat/destillerat eller avjoniserat vatten.
- värm till kokning för att lösa upp mediet helt.
- sterilisera genom autoklavering vid 15 lbs-tryck (121 msk C) i 15 minuter.
- efter autoklavering, lämna för kylning till 45-50 C. C.
- Obs: i specifikt arbete, när pH 3,5 krävs, surgör mediet med steril 10% vinsyra. Mängden syra som krävs för 100 ml sterilt, kylt medium är ungefär 1 ml och värm inte mediet igen efter tillsatsen av syran.
- blanda väl före dosering.
- häll Potatisdextrosagar i varje platta och lämna plattorna på den sterila ytan tills agaren har stelnat.
- förvara tallrikarna i kylskåp vid 2-8 msk C.
förvaring och hållbarhet för Potatisdextrosagar ( PDA)
- Förvara vid 2-8 OCCC och borta från direkt ljus.
- Media ska inte användas om det finns några tecken på försämring (krympning, sprickbildning eller missfärgning), kontaminering.
- produkten är lätt och temperaturkänslig; skyddar mot ljus, överdriven värme, fukt och frysning.
testkrav
- testprover ( prover eller svamptillväxt)
- Inokuleringsslinga
- bunsenbrännare
- inkubator
- Kontrollstammar (Candida albicans ATCC 10231 och Trichophyton rubrum
ATCC ® 28188)
provningsförfarande (prov/organisminokulering)
- låt plattorna värma vid 37 kcal C eller till rumstemperatur, och agarytan torkar före ympning.
- ta två plattor för ett prov.
- inokulera och strimma provet så snart som möjligt efter insamling.
- om provet som ska odlas är på en vattpinne, rulla vattpinnen över ett litet område av agarytan.
- strimma för isolering med en steril slinga.
- inkubera en platta aerobt vid rumstemperatur ( 20-25 Baccarat) medan en annan 35-37 Baccarat upp till 4 veckor ( beroende på vilken typ av organismer som misstänks)
- undersöka koloni egenskaper.
resultat tolkning av PDA
- Kontrollstammar dvs Candida albicans ATCC 10231 (snabb odlare) och Trichophyton rubrum (långsam odlare) ATCC 28188): Förekomst av tillväxt
- förekomst av svampar i prov: närvaro av tillväxt på PDA
koloni egenskaper hos olika organismer i PDA
Candida albicans: tillväxt; släta vita kolonier efter 24-48 timmar
Trichophyton rubrum: tillväxt sett i 7 dagar och det kan ta 3-4 veckor för röd färg på baksidan av kolonin för att vara synlig.
ändring av PDA
- Potato Dextrose Agar med TA (vinsyra): den använder för mikrobiell undersökning av mat och mejeriprodukter.
- Potato Dextrose Agar med Klortetracyklin: den använder är för mikrobiell uppräkning av jäst och mögel från kosmetika.
- Potatisdextrosagar med kloramfenikol: den använder för selektiv odling av svampar från blandade prover.
användning av potatis dextros Agar ( PDA)
- PDA använder för detektering av svampar från mejeriprodukter, beredda livsmedel samt vattenprover.
- det använder också för odling av svampar (jäst och mögel) från kliniska prover.
- detta medium är också tillämpligt för pigmentuttryck samt sporulering.
- olika modifierade handdatorer och deras tillämpningar är följande-PDA med TA används för mikrobiell undersökning av livsmedel och mejeriprodukter medan PDA med klortetracyklin användningar är för mikrobiell uppräkning av jäst och mögel från kosmetika. PDA med kloramfenikol används för selektiv odling av svampar från blandade prover.
Keynotes på PDA
- uppvärmning av mediet efter försurning (införlivande av vinsyra) bör undvikas eftersom det kan hydrolysera agar som kan göra agaren oförmögen att stelna.
- 4,0 g potatisextrakt motsvarar 200 g potatisinfusion.
- den ursprungliga potatisdextrosagaren stöder inte bara tillväxten av svampar utan också vissa sura bakterier och därmed föredras dess modifieringar.
- mängden klortetracyklin 40,0 mg, kloramfenikol 25,0 mg och vinsyra 1.4 gm kan använda i 1000 ml PDA i modifierade former dessutom.
ytterligare avläsningar på PDA
- Medicinsk mykologi. Redaktörer: Emmons och Binford, 2: a upplagan 1970, Utgivare Lea och Febiger, Philadelphia.
- Rippons JW: Medicinsk mikrobiologi. De patogena svamparna och de patogena Aktinomyceterna. 3: e upplagan 1988 Utgivare WB Saunder co, Philadelphia.
- Handbok för klinisk Mikrobiologiprocedur, chef i redaktör H. D. Isenberg, Albert Einstein College of Medicine, New York, Utgivare ASM (American Society for Microbiology), Washington DC.
- en textbok om medicinsk mykologi. Redaktör: Jagdish Chander. Publikation Mehata, Indien.
- Praktisk Laboratoriemykologi. Redaktörer: Koneman E. W. och G. D. Roberts, 3: e upplagan 1985, Utgivare Williams och Wilkins, Baltimore.
- https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/PotatoDextroseAgar.htm
- http://himedialabs.com/TD/M096.pdf
- https://en.wikipedia.org/wiki/Potato_dextrose_agar