nestekromatografia (LC) – korkean erotuskyvyn nestekromatografia (HPLC), Ionikromatografia (IC) ja nestekromatografia massaspektrometrialla (LC-MS)
nestekromatografia on yksi analyysilaboratorion tehokkaimmista työkaluista. Sitä käytetään hyvin laajalti kaikentyyppisten yhdisteiden seosten erottamiseen ja analysointiin. Yhdistettynä massaspektrometrian herkkyyteen ja selektiivisyyteen sen teho paranee huomattavasti.
miten korkean suorituskyvyn nestekromatografia, Ionikromatografia ja nestekromatografia massaspektrometrialla toimivat?
Nestekromatografiassa neste (liikkuva faasi / eluentti) virtaa korkeassa paineessa inertin putken (kolonnin) läpi, joka on pakattu hienoon jauheeseen, joka voidaan päällystää nesteellä (stationäärifaasi). Näyte ruiskutetaan eluenttiin ennen kolonnia. kun näyte liikkuu kolonnin läpi, kunkin näytteessä olevan yhdisteen kolonnin loppuun kuluva aika määräytyy sen vuorovaikutuksen perusteella eluentin ja stationäärifaasin kanssa. Tämä riippuu yhdisteen ominaisuuksista ja siitä voidaan erottaa hyvin samankaltaisten yhdisteiden seoksia. Kun yhdisteet on erotettu toisistaan, niitä voidaan mitata niiden noustessa kolonnista erilaisilla ilmaisimilla, jotka ovat sekä epäselektiivisiä että selektiivisiä, mukaan lukien massaspektrometrit.
eri pakkausmateriaalit tukevat erilaisia erotusmekanismeja: normaalifaasi, käänteisfaasi, kokoerotus, ioninvaihto, affiniteetti, kiraalinen tai hydrofiilinen vuorovaikutus HPLC. Normaalifaasissa LC käyttää polaarista stationäärifaasia ja vähemmän polaarista tai ei-polaarista eluenttia. Käänteisfaasissa LC nämä polariteetit ovat päinvastaisia.
miten Ionikromatografia vaikuttaa?
Ionikromatografia (IC) on HPLC: llä esiintyvä muunnos, jossa stationäärifaasivuorovaikutus perustuu ioninvaihtoon. Siksi sitä käytetään erillisiin ioneihin tai varautuneisiin lajeihin. Anionit ja kationit on erotettu toisistaan erillisillä sarakkeilla. Toisin kuin HPLC: ssä, jossa pääpaino on samankaltaisten yhdisteiden erottamisessa, IC: ssä erotukset ovat yleensä vakio ja painopiste on tarkkuudessa ja herkkyydessä. Ionien erilaisten ominaisuuksien vuoksi johtokykyilmaisimia käytetään usein; herkkyyden parantamiseksi eluentin taustajohtavuus poistetaan ennen ionien havaitsemista. Paljon suuremman herkkyyden saavuttamiseksi ionit voidaan esikeskittää lyhyeen ioninvaihtopylvääseen ja sitten eluoida eluenttivirtaan erotusta varten. Tämä tarjoaa erittäin tehokkaan tavan määrittää monien anionien jälkiä. IC: tä käytetään usein täydentämään näytteen metallien ICP-MS-määritystä.
mitä varten nestekromatografia (LC) on?
nestekromatografia sisältää ylivoimaisesti yleisimpiä tekniikoita, joita käytetään seoksen yhden tai useamman komponentin määrittämiseen. Sopivalla eluentti-ja stationäärifaasin valinnalla voidaan kaikki liuoksessa olevat yhdisteet erottaa toisistaan. HPLC: tä käytetään orgaanisten yhdisteiden seosten korkeapaineerotukseen. IC mahdollistaa anionien ja kationien sekä muiden varautuneiden lajien määrittämisen.. LC-MS: n etuna on, että se voi tarjota komponenttien valikoivan havaitsemisen, mikä vähentää tarvetta erottaa komponentit täysin kromatografisesti. Se voi myös tarjota ylimääräisiä rakenne-ja molekyylipainotietoja tunnistamisen helpottamiseksi.
miksi käyttäisit nestekromatografiaa (LC)?
korkean erotuskyvyn Nestekromaatti (HPLC)
HPLC on valittu tekniikka, kun analysoidaan materiaaleja mahdollisimman monenlaisille orgaanisille yhdisteille. Haihtuvat yhdisteet (VOC ja SVOCs) analysoidaan yleensä parhaiten GC: llä tai GC-MS: llä, mutta HPLC: tä voidaan soveltaa paljon laajempiin seoksiin, mukaan lukien haihtumattomat tai termisesti epästabiilit molekyylit. Sen etuja ovat monipuolisuus, herkkyys ja sovellettavuus hyvin monimutkaisiin seoksiin.
Ionikromatografia (IC)
IC on HPLC: n variantti, jossa stationäärifaasi on ioninvaihtohartsi. Tämä mahdollistaa ionien ja varautuneiden komponenttien erottamisen ja sitä käytetään yleisesti kationien ja erityisesti anionien määrittämiseen vesinäytteistä. Se on helppo kvantifioida ja pre-concentration tekniikoita, voidaan saavuttaa erittäin korkea herkkyys.
nestekromatografia massaspektrometrialla (LC-MS)
LC-MS tarjoaa suuren herkkyyden ja selektiivisyyden. Se on valittu menetelmä monimutkaisten yhdisteseosten analysoimiseksi sekä tuntemattomien tunnistamiseksi että kvantitatiivisten tietojen saamiseksi hivenaineista/vähäisistä komponenteista. LC: n ja MS: n yhdistelmä tarjoaa paljon tietoa yhdisteen tunnistamisen helpottamiseksi.
Nestekromatografian (LC) tyypit
Nestekromatografian monipuolisuus on johtanut monenlaisiin instrumentointeihin eri sovelluksissa. Lähes kaikki LC suoritetaan erittäin korkeassa paineessa, jota tarvitaan liikkuvan faasin pumppaamiseen pakatun sängyn hienojen helmien läpi. UHPLC käyttää hienompia helmiä ja toimii vielä suuremmissa paineissa.
saatavilla on laaja valikoima erilaisia ilmaisimia. MS on tehokkain ja joustavin; monet MS-ilmaisimet ovat matalaresoluutioisia kvadrupoliyksiköitä, mutta korkean resoluution massaspektrometrit tarjoavat mahdollisuuden yksiselitteisiin tunnistuksiin. Laajalti käytettyjä ilmaisimia ovat spektrofotometrit useimpiin herkkyyssovelluksiin ja sähkönjohtavuus IC: lle.
miten saada tarkimmat & luotettavat tiedot HPLC: stä Ultrapurevedellä-lataa ilmainen pohjustusaineemme jo tänään!